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福林酚试剂介绍

发布时间:2024-06-28 10:59:00

        福林酚试剂采用钨酸钠、钼酸钠、磷酸、浓盐酸按一定比例加热回流后加入硫酸锂精制而成,色泽金黄、透亮,是实验室测定溶液中蛋白质、多肽、多酚或酪氨酸等物质含量的常用试剂。本品酸度为 1N或者2N,请根据实验需要直接使用或适当稀释。本试剂可测定蛋白浓度 0.05~1mg/mL,当蛋白浓度范围为 0.05~0.5mg/mL 时,线性关系最好。如果待测样品蛋白浓度超过此范围,请适当稀释到合适浓度范围。

         福林酚 :外观(性状): 黄色液体;储存条件: 常温,3个月。注意避光,有条件客户冰箱冷藏储存,可适当延长保质期。
         试剂配制方法如下(供参考,相关所需要的溶液我公司商城/公众号均有销售,可通过官网:https://www.gzsamhoo.com.cn/;公众号:广州市信洪贸易有限公司查询订购产品
          一、福林酚A液:

         1) 4%碳酸钠溶液;2) 0.2mol/L氢氧化钠溶液;3) 1%硫酸铜溶液;4) 2%酒石酸钾钠溶液。临用前将(1)与(2)等体积配制碳酸钠—氢氧化钠溶液。(3)与(4)等体积配制成硫酸铜—酒石酸钾钠溶液。然后这两种试剂按50:1的比例配合,即成Folin—酚试剂A。此试剂临用前配制,一天内有效。

         二、福林酚B液:

          福林酚B液,本试剂的浓度为 1mol/L或者2mol/L,此为 Folin-酚试剂应用液。操作方法(仅供参考)

           以下步骤适用于蛋白浓度测定:

           1)标准曲线的制作:取 14 支试管分成两组,分别加入 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250µg/mL),用水补足到 1mL,加入 5mL 试剂甲,混匀,于 20-25℃放置 10 分钟,再加入 0.5mL 试剂乙,立即摇匀,在 20-25℃保温 30 分钟,然后于 500nm 处比色。测定光密度值,取两组测定的平均值,以蛋白质浓度为横座标,光密度值为纵座标,绘制标准曲线值为定量的依据。

           2)样品测定:取 1mL样品溶液(约合 20-250µg/多肽或蛋白质)加入5mL试剂甲混匀,于20-25℃放置 10 分钟,再加0.5mL试剂乙(Folin-酚),立即摇匀,在 20-25℃保温 30 分钟,然后于 500nm 处比色,以 1mL 水代替样品作空白对照。测定后,可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。若用 0.5cm 光程的比色杯进行比色,可按下面方法进行操作:取 0.2mL样品溶液(约5-100µg 多肽或蛋白质)加入 1mL试剂甲(可选用 0.3-0.5cm 直径的小试管)混匀,10 分钟以后,再加入 0.1mL 试剂乙 ,立即混匀,30 分钟后比色。一般来说,若多肽或蛋白质的浓度在 2-25µg,测波长 755nm,而 25µg 以上则采用 500nm 比色为宜。

            公司商城官网:http://www.gzsamhoo.com.cn/;公众号:广州市信洪贸易有限公司https://mp.weixin.qq.com/s/6wnsQ4c5dAMcnnUJSzILtw